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磷酸缓冲液_百度百科

液_百度百科 网页新闻贴吧知道网盘图片视频地图文库资讯采购百科百度首页登录注册进入词条全站搜索帮助首页秒懂百科特色百科知识专题加入百科百科团队权威合作下载百科APP个人中心磷酸缓冲液播报讨论上传视频生物化学用品收藏查看我的收藏0有用+10磷酸缓冲液（PB，Phosphate Buffer），是生物化学研究中使用最为广泛的一种缓冲液，通常使用的有磷酸钠缓冲液（NaH2PO4&Na2HPO4）和磷酸钾缓冲液（K2HPO4&KH2PO4)，由于它们有二级解离，缓冲的pH值范围很广。中文名磷酸缓冲液外文名Phosphate Buffer成    分NaH2PO4&Na2HPO4磷酸缓冲液PH5.7--8.0目录1主要作用2配制方法3缓冲范围4浓度计算5优缺点主要作用播报编辑PB(Phosphate Buffered)，主要用于化学实验。简称：PB或者PB缓冲液配制方法播报编辑0.2M磷酸缓冲液磷酸缓冲液PH5.7--8.0(0.2M)甲液：NaH2PO4·2H2O：Mr=156.03，0.2mol/L溶液为31.21g/L，NaH2PO4·H2O：Mr=138.01，0.2mol/L溶液为27.6g/L。乙液：Na2HPO4·2H2O：Mr=178.05，0.2mol/L溶液为35.61g/L，Na2HPO4·7H2O：Mr=268.13，0.2mol/L溶液为53.624 g/L ，Na2HPO4·12H2O：Mr=358.22，0.2mol/L溶液为71.64g/L。磷酸缓冲液PH5.7--8.0(0.2M)PH甲液X(ml)乙液Y(ml)PH甲液X(ml)乙液Y(ml)5.793.56.56.945555.8928739615.990107.13367687.712.37.228726.185157.323776.281.518.57.419816.377.522.57.516846.473.526.57.613876.568.531.57.710.589.56.662.537.57.88.591.56.756.543.57.97936.8514985.394.7根据要求的PH值,取X毫升甲液与Y毫升乙液,混合均匀即得.1/15M 磷酸缓冲液磷酸缓冲液PH4.49--9.18(1/15M)PH 甲液X(ml) 乙液Y(ml) PH 甲液X(ml) 乙液Y(ml)PH甲液X(ml)乙液Y(ml)PH甲液X(ml)乙液Y(ml)4.490106.89644.940.19.97.17735.290.259.757.38825.590.59.57.78915.91198.049.50.56.24288.29.70.36.47378.39.750.256.64468.689.90.16.81559.18100乙液：一水磷酸二氢钠,1/15M溶液含9.2g/L甲液：二水磷酸氢二钠,1/15M溶液含11.864g/L根据要求的PH值,取X毫升甲液与Y毫升乙液,混合均匀即得.缓冲范围播报编辑磷酸缓冲液的缓冲pH值范围非常广泛，可配置各种pH值的酸性、碱性和中性缓冲液，配制酸性缓冲液可直接用NaH2PO4或KH2PO4，pH范围在1-5；碱性缓冲液可直接用Na2HPO4或K2HPO4，pH范围在9-12；中性缓冲液则用等浓度的NaH2PO4和Na2HPO4或者等浓度的KH2PO4和K2HPO4溶液混合，pH在5.5-8.5。浓度计算播报编辑通常所说的磷酸缓冲液的浓度是指溶液中含有的所有的磷酸根离子的浓度，而不是钠离子（Na+）或者钾离子（K+）的浓度。正是因为如此，在配制中性缓冲液时，用等浓度的NaH2PO4和Na2HPO4或者等浓度的KH2PO4和K2HPO4溶液混合，并不影响磷酸根离子的浓度，所得的缓冲液浓度仍是等浓度的NaH2PO4和Na2HPO4或者等浓度的KH2PO4和K2HPO4溶液原来的浓度，但是缓冲液中的钠离子（Na+）或者钾离子（K+）的浓度已经发生变化。优缺点播报编辑磷酸缓冲液的优点：（1）易配制各种浓度的缓冲液；（2）适用的pH值范围宽，可配置各种pH值的缓冲液；（3）pH受温度影响较小；（4）缓冲能力强，缓冲液被稀释后pH变化小。磷酸缓冲液的缺点：（1）易与常见的钙离子Ca2+、Mg2+及一些重金属离子缔合形成沉淀；（2）会抑制某些生化反应过程，如抑制某些酶的催化过程等。新手上路成长任务编辑入门编辑规则本人编辑我有疑问内容质疑在线客服官方贴吧意见反馈投诉建议举报不良信息未通过词条申诉投诉侵权信息封禁查询与解封©2024 Baidu 使用百度前必读 | 百科协议 | 隐私政策 | 百度百科合作平台 | 京ICP证030173号 京公网安备110000020000

不同pH磷酸缓冲液（PB buffer）的配制方法介绍 - 知乎

不同pH磷酸缓冲液（PB buffer）的配制方法介绍 - 知乎切换模式写文章登录/注册不同pH磷酸缓冲液（PB buffer）的配制方法介绍药学科研崽南京大学博士、中国药科大学硕，药学问题可付费询问，详细答疑！磷酸缓冲液也叫做磷酸盐缓冲液，英文名为Phosphate Buffer，是生物化学研究中使用最为广泛的一种缓冲液，磷酸缓冲液的配制我们一起来了解一下。首先，按照下表所给定的体积，混合1 mol/L的磷酸二氢钠(单碱)和1mol/L磷酸氢二钠(双碱)贮液，获得所需pH的磷酸缓冲液。配制1 mol/L 的磷酸二氢钠(NaH2PO4?H2O)贮液：溶解138g于足量水中，使终体积为1L; 1mol/L 磷酸氢二钠(Na2HPO4)贮液:溶解142g于足量水中使终体积为1L。1mol/L 磷酸二氢钠(ml) lmol/L 磷酸氢二钠(ml) 最终pH值877 133 6.0850 150 6.1815 185 6.2775 225 6.3735 265 6.4685 315 6.5625 375 6.6565 435 6.7510 490 6.8450 550 6.9390 610 7.0330 670 7.1280 720 7.20.1mol/L是在1L水中含有的磷酸盐物质的总摩尔。 用磷酸氢二钠和磷酸二氢钠做缓冲液其浓度为： 磷酸氢二钠20.7472g/L; 磷酸二氢钠3.1167g/L。即若配制100mL，则在100ml水中加入2.0747g磷酸氢二钠和0.3117g磷酸二氢钠。通常使用的磷酸钠缓冲液有磷酸钠缓冲液(NaH2PO4&Na2HPO4)和磷酸钾缓冲液 (K2HPO4&KH2PO4)，由于它们有二级解离，缓冲的pH值范围很广。那么，各种PH值的磷酸盐缓冲液如何配置?各种PH值的磷酸盐缓冲液的配制磷酸盐缓冲液取磷酸二氢钠38.0g，与磷酸氢二钠5.04g,加水使成1000ml,即得。磷酸盐缓冲液(pH2.0)甲液:取磷酸16.6ml，加水至1000ml，摇匀。乙液：取磷酸氢二钠71.63g，加水使溶解成1000ml。取上述甲液72.5ml与乙液27.5ml混合，摇匀，即得。磷酸盐缓冲液(pH2.5)取磷酸二氢钾100g，加水800ml，用盐酸调节pH至2.5,用水稀释至1000ml。磷酸盐缓冲液(pH5.0)取0.2mol/L磷酸二氢钠溶液一定量,用氢氧化钠试液调节pH值至5.0，即得。磷酸盐缓冲液(pH5.8)取磷酸二氢钾8.34g与磷酸氢二钾0.87g,加水使溶解成1000ml，即得。磷酸盐缓冲液(pH6.5)取磷酸二氢钾0.68g,加0.1mol/L氢氧化钠溶液15.2ml，用水稀释至100ml，即得。磷酸盐缓冲液(pH6.6)取磷酸二氢钠1.74g、磷酸氢二钠2.7g与氯化钠1.7g，加水使溶解成400ml，即得。磷酸盐缓冲液(含胰酶)(pH6.8)取磷酸二氢钾6.8g,加水500ml使溶解,用0.1mol/L氢氧化钠溶液调节pH值至6.8;另取胰酶10g，加水适量使溶解，将两液混合后,加水稀释至1000ml，即得。磷酸盐缓冲液(pH6.8)取0.2mol/L磷酸二氢钾溶液250ml，加0.2mol/L氢氧化钠溶液118ml，用水稀释至1000ml，摇匀，即得。磷酸盐缓冲液(pH7.0)取磷酸二氢钾0.68g，加0.1mol/L氢氧化钠溶液29.1ml，用水稀释至100ml，即得。磷酸盐缓冲液(pH7.2)取0.2mol/L磷酸二氢钾溶液50ml与0.2mol/L氢氧化钠溶液35ml，加新沸过的冷水稀释至200ml，摇匀，即得。 磷酸盐缓冲液(pH7.3)取磷酸氢二钠1.9734g与磷酸二氢钾0.2245g,加水使溶解成1000ml，调节pH值至7.3，即得。磷酸盐缓冲液(pH7.4)取磷酸二氢钾1.36g， 加0.1mol/L氢氧化钠溶液79ml，用水稀释至200ml，即得。磷酸盐缓冲液(pH7.6)取磷酸二氢钾27.22g，加水使溶解成1000ml，取50ml，加0.2mol/L氢氧化钠溶液42.4ml，再加水稀释至200ml，即得。磷酸盐缓冲液(pH7.8)甲液：取磷酸氢二钠35.9g，加水溶解，并稀释至500ml。乙液：取磷酸二氢钠2.76g，加水溶解，并稀释至100ml。取上述甲液91.5ml与乙液8.5ml混合，摇匀，即得。磷酸盐缓冲液(pH7.8～8.0)取磷酸氢二钾5.59g与磷酸二氢钾0.41g，加水使溶解成1000ml，即得。第二种方法：1. A液（0.2M磷酸二氢钠水溶液）： NaH2 PO4 ・H2 O 27.6g，溶于蒸馏水中，稀释至1000ml。2. B液（0.2M磷酸氢二钠水溶液）：Na2 HPO4 ・7H2 O 53.6g (或Na2 HPO4 ・12 H2 O 71.6g或Na2 HPO4 ・2 H2 O 35.6g ) 加蒸馏水溶解，加水至1000ml。3. 不同pH值磷酸盐缓冲液（PB）缓冲液的配制A液X ml (参照下表) 中，加入B液Y ml，为0.2M PB。若再加蒸馏水至200ml则成0.1M PB。PHX mlY mlpHX mlY ml5.793.56.56.945.055.05.892.08.07.039.061.05.990.010.07.133.067.06.087.712.37.228.072.06.185.015.07.323.077.06.281.518.57.419.081.06.377.522.57.516.084.06.473.526.57.613.087.06.568.531.57.710.090.06.662.537.57.88.591.56.756.543.57.97.093.06.851.049.08.05.394.7若先分别配成0.1M，1/15M 和1/200 M的A液和B液，可按下表配成相应浓度所需pH值的PBKH2 PO4 或NaH2 PO4 H2 O (ml )Na2 HPO4 (ml )pH ( M/10 )pH( M/15 )pH( M/200 )4645.675.745.944555.785.836.064465.865.916.144375.945.996.224286.026.076.304196.086.146.3640106.126.196.4239116.176.246.4738126.236.286.5737136.286.326.6136146.336.376.6535156.396.416.6834166.416.456.7233176.456.496.7532186.496.536.7931196.536.566.8230206.556.596.8829216.586.636.9128226.616.686.9527236.656.727.0026246.706.767.0525256.766.817.0924266.816.867.1323276.846.917.1622286.896.947.1821296.896.967.2020306.916.987.2219316.947.017.2518326.977.037.2617337.007.057.3116347.027.077.3415357.067.117.3814367.107.157.4113377.147.207.4512387.177.247.4511397.247.287.5110407.307.337.599417.367.407.658427.427.497.707437.497.547.756447.577.617.805457.657.697.873477.817.858.052487.927.978.15发布于 2022-05-23 20:18pbs缓冲液​赞同 89​​23 条评论​分享​喜欢​收藏​申请

你真的懂PBS吗 - 知乎

你真的懂PBS吗 - 知乎首发于膜片钳技术交流切换模式写文章登录/注册你真的懂PBS吗崔仍奋进神经生物/膜片钳/阅读爱好者在我们平时的实验中，经常要用到PB和PBS，那么，你真的了解什么是PBS吗？PB 是“phosphate buffer”的缩写，一般称为“磷酸缓冲溶液”，依靠磷酸缓冲对（H2PO4-和HPO42-）起到维持溶液pH值的作用，阳离子则一般是Na+或K+。PBS 是“phosphate buffer saline”的缩写，中文通常称其为“磷酸缓冲盐溶液”，但更准确地译名应该是“磷酸缓冲生理盐水”，是生物实验广泛使用的一种缓冲溶液。通常是在PB的基础上加入NaCl，拥有和人体体液类似的渗透压和pH值。为了满足其它需求，有时也加入K+，Ca2+或Mg2+。1.缓冲pH范围磷酸缓冲液的缓冲pH值范围非常广泛，可配置各种pH值的酸性、碱性和中性缓冲液。酸性缓冲液：可直接用NaH2PO4或KH2PO4，pH范围在1-5；碱性缓冲液：可直接用Na2HPO4或K2HPO4，pH范围在9-12；中性缓冲液：用等浓度的NaH2PO4和Na2HPO4或者等浓度的KH2PO4和K2HPO4溶液按照不同比例进行混合，pH在5.5-8.5。2.浓度计算通常所说的磷酸缓冲液的浓度，比如0.1M、0.01M，是指溶液中含有的所有的磷酸根离子的浓度，包括解离的和未解离的，而不是Na+或者K+的浓度。正是因为如此，在配制中性缓冲液时，用等浓度的NaH2PO4和Na2HPO4或者等浓度的KH2PO4和K2HPO4溶液混合，并不影响磷酸根离子的浓度。3.配置方法PBS的配置方案有很多，最常见的如下所示。至于我们组目前在使用的方案，大同小异，原理是相同的，同学们在使用的时候自己判断吧。1×PBS配置方法（1L）：按上表称取物质，溶于800ml水中。调节pH至7.4，然后定容至1L。由于使用量比较大，频率比较高，所以我们一般都会配置10×或者20×的母液，使用的时候直接稀释，这样比较方便。10×PBS配置方法（1L）：按上表称取物质，溶于800ml水中。调节pH至6.8，然后定容至1L。使用的时候稀释10倍，pH就会变至7.4了（搜到的资料里都这么说，但是每个实验室的实验条件不一样，所以具体情况具体分析）。4.磷酸缓冲液优缺点优点：易配制各种浓度的缓冲液；适用的pH值范围宽，可配置各种pH值的缓冲液；pH受温度影响较小；缓冲能力强，缓冲液被稀释后pH变化小。缺点：易与常见的钙离子Ca2+、Mg2+及一些重金属离子缔合形成沉淀；会抑制某些生化反应过程，如抑制某些酶的催化过程等。5.参考资料缓冲对_百度百科磷酸缓冲液_百度百科pbs缓冲液_百度百科Wikipedia. "Phosphate-buffered saline."Cold Spring Harbor Protocols编辑于 2017-01-20 16:52电生理生物学生物实验​赞同 136​​22 条评论​分享​喜欢​收藏​申请转载​文章被以下专栏收录膜片钳技

常用缓冲液的配制-磷酸盐缓冲液 - 知乎

常用缓冲液的配制-磷酸盐缓冲液 - 知乎切换模式写文章登录/注册常用缓冲液的配制-磷酸盐缓冲液IGHIRUNDO生物，化学，药物，生物信息，分子生物，基因操作，研究生，影视一、磷酸盐缓冲液磷酸盐（Na2HPO4和NaH2PO4）是使用最广泛，pH范围最宽的缓冲盐，它是二级解离，有两个pKa值（NaH2PO4：pKa1=2.12，pKa2=7.21，Na2HPO4：pKa1=7.21，pKa2=12.32）。配制酸性缓冲液用NaH2PO4，pH范围1-4。配制中缓冲液用混合的两种缓冲盐，pH范围6-8。配制碱性缓冲液用Na2HPO4，pH范围10-12。磷酸盐缓冲液的配制表如下所示通常情况下，用钾盐比钠盐效果更好，因为低温下钠盐难溶而钾盐易溶，但若配制SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳缓冲液时只能用钠盐，因为钾盐会与SDS形成难溶的十二烷基磺酸钾。磷酸盐缓冲液的优缺点：优点：①能配制成各种浓度 的缓冲液②适用的pH范围宽③pH受温度影响小④缓冲液稀释后，pH变化小，稀释10倍，pH变化仅为0.1.缺点：①易与常见的钙镁离子及金属离子缔合成沉淀②会抑制某些生物化学过程，抑制多数酶的活力，包括激酶、磷酸化酶、脱氢酶和以磷酸酯为底物的酶的催化作用都会产生某种程度的抑制作用。编辑于 2022-04-25 13:22化学实验微乳化化学​赞同 41​​84 条评论​分享​喜欢​收藏​申请

PBS缓冲液_百度百科

冲液_百度百科 网页新闻贴吧知道网盘图片视频地图文库资讯采购百科百度首页登录注册进入词条全站搜索帮助首页秒懂百科特色百科知识专题加入百科百科团队权威合作下载百科APP个人中心PBS缓冲液播报讨论上传视频溶解保护试剂收藏查看我的收藏0有用+10本词条由《中国科技信息》杂志社 参与编辑并审核，经科普中国·科学百科认证 。PBS缓冲液，是生物化学研究中使用最为广泛的一种缓冲液，主要成分为Na2HPO4、KH2PO4、NaCl和KCl，一般作为溶剂，起溶解保护试剂的作用。由于Na2HPO4和KH2PO4有二级解离，缓冲的pH值范围很广，而NaCl和KCl主要作用为增加盐离子浓度。如有需要PBS还可以补加1 mmol/L CaCl2和0.5 mmol/L MgCl2，以提供二价阳离子。注：PBS不是磷酸缓冲液（phosphate buffer solution，PB）。中文名磷酸缓冲盐溶液外文名phosphate buffered saline（PBS）目    的溶解保护试剂应用领域生物化学研究主要成分Na2HPO4、KH2PO4、NaCl和KCl目录1配制方法2作用配制方法播报编辑称取8.0g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4、0.24g KH2PO4溶于800mL蒸馏水中，用HCl调节溶液至7.4，最后加蒸馏水定容至1L即可得0.01M PBS缓冲液。作用播报编辑PBS是磷酸缓冲盐溶液的简称，不仅伪狂犬病毒要用它稀释，一般的有活性的生物制剂都要用它来稀释。原因就是它具有盐平衡、可调整的适宜pH缓冲作用，蒸馏水不具有盐平衡作用，可以破坏生物蛋白的结构及生物特性；生理盐水不具有调整pH的作用，对完整的、具有活性的物质不能保证其在最适条件下参与生物反应，所以使用PBS是首选。在细胞培养中，它通常用于洗涤传代培养中的细胞，以及在计数细胞时作为稀释溶液。 [2]PBS也不是万能的，有的生物活性物质需要的条件比PBS还要高，就需要在平衡缓冲液中加入更多的成分，维持最佳的条件保证生物活性物质保持其最完整的特性 [1]。新手上路成长任务编辑入门编辑规则本人编辑我有疑问内容质疑在线客服官方贴吧意见反馈投诉建议举报不良信息未通过词条申诉投诉侵权信息封禁查询与解封©2024 Baidu 使用百度前必读 | 百科协议 | 隐私政策 | 百度百科合作平台 | 京ICP证030173号 京公网安备110000020000

磷酸盐缓冲液（PB）的配制 - 实验方法 - 丁香通

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磷酸盐缓冲液（PB）的配制

磷酸盐缓冲液（PB）的配制

关键词： 磷酸盐缓冲液 PB 配制

来源： 互联网

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1. A液（0.2M磷酸二氢钠水溶液）： NaH2 PO4 ・H2 O 27.6g，溶于蒸馏水中，稀释至1000ml。

2. B液（0.2M磷酸氢二钠水溶液）：Na2 HPO4 ・7H2 O 53.6g (或Na2 HPO4 ・12 H2 O 71.6g或Na2 HPO4 ・2 H2 O 35.6g ) 加蒸馏水溶解，加水至1000ml。

3. 不同pH值磷酸盐缓冲液（PB）缓冲液的配制

A液X ml (参照下表) 中，加入B液Y ml，为0.2M PB。若再加蒸馏水至200ml则成0.1M PB。

PH

X ml

Y ml

pH

X ml

Y ml

5.7

93.5

6.5

6.9

45.0

55.0

5.8

92.0

8.0

7.0

39.0

61.0

5.9

90.0

10.0

7.1

33.0

67.0

6.0

87.7

12.3

7.2

28.0

72.0

6.1

85.0

15.0

7.3

23.0

77.0

6.2

81.5

18.5

7.4

19.0

81.0

6.3

77.5

22.5

7.5

16.0

84.0

6.4

73.5

26.5

7.6

13.0

87.0

6.5

68.5

31.5

7.7

10.0

90.0

6.6

62.5

37.5

7.8

8.5

91.5

6.7

56.5

43.5

7.9

7.0

93.0

6.8

51.0

49.0

8.0

5.3

94.7

若先分别配成0.1M，1/15M 和1/200 M的A液和B液，可按下表配成相应浓度所需pH值的PB

KH2 PO4 或NaH2 PO4 H2 O (ml )

Na2 HPO4 (ml )

pH ( M/10 )

pH( M/15 )

pH( M/200 )

46

4

5.67

5.74

5.94

45

5

5.78

5.83

6.06

44

6

5.86

5.91

6.14

43

7

5.94

5.99

6.22

42

8

6.02

6.07

6.30

41

9

6.08

6.14

6.36

40

10

6.12

6.19

6.42

39

11

6.17

6.24

6.47

38

12

6.23

6.28

6.57

37

13

6.28

6.32

6.61

36

14

6.33

6.37

6.65

35

15

6.39

6.41

6.68

34

16

6.41

6.45

6.72

33

17

6.45

6.49

6.75

32

18

6.49

6.53

6.79

31

19

6.53

6.56

6.82

30

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Tris or Trizma® Buffer Preparation – pH vs. Temperature

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Citric Acid – Na2HPO4 Buffer Preparation, pH 2.6-7.6

Citric Acid – Sodium Citrate Buffer Preparation, pH 3.0-6.2

Sodium Acetate – Acetic Acid Buffer Preparation, pH 3.7-5.6

Na2HPO4 – NaH2PO4 Buffer Preparation, pH 5.8-8.0 at 25 °C

Imidazole (glyoxaline) – HCl Buffer Preparation, pH 6.2-7.8 at 25 °C

Sodium Carbonate – Sodium Bicarbonate Buffer Preparation, pH 9.2-10.8

Buffer Preparation Formulas and Equations

Choosing the Right Biological Buffer

Choose a buffer based on your pH requirements as well as the pKa, a measure of acid strength that accounts for pH, concentration, and temperature. Regulatory or purity needs for your exact application should also be considered. The following tables can help you navigate preparation of many common buffer solutions by pH and pKa.

In addition to the tables below, we've developed several buffer recipe calculators to assist your buffer preparation.

TBE and TAE for gel electrophoresis have slightly more involved recipes. We can help you pick the right one.

What are buffer grades?

Buffer grade indicates the quality and impurity levels appropriate for different uses. We provide six grades of buffers indicated for general lab use, final pharmaceutical formulation and manufacturing, and applications in between that may need trace metal testing or materials of a specified purity.

Useful pH Ranges of Selected Biological Buffers Chart (25 °C, 0.1 M)

Tris or Trizma® Buffer Preparation Table – pH vs. Temperature

Phosphate Buffer Preparation Table – 0.2 M solution

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Citric acid monohydrate, C6H8O7 • H2O, MW 210.14; 0.1 M contains 21.01 g/L. Na2HPO4, MW 141.98; 0.2 M contains 28.40 g/L, or Na2HPO4 • 2H2O, MW 178.05; 0.2 M contains 35.61 g/L.

x mL 0.1 M-citric acid and y mL 0.2 M-Na2HPO4 mixed

Citric Acid – Sodium Citrate Buffer Preparation, pH 3.0-6.21

Citric acid monohydrate, C6H8O7 • H2O, MW 210.14; 0.1 M contains 21.01 g/L. Trisodium citrate dihydrate, C6H5O7Na3 • 2H2O, MW 294.12; 0.1 M contains 29.41 g/L.

x mL 0.1 M-citric acid and y mL 0.1 M-trisodium citrate mixed

Sodium Acetate – Acetic Acid Buffer PREPARATION, pH 3.7–5.61

Sodium acetate trihydrate, CH3COONa • 3H2O, MW 136.09; 0.2 M contains 27.22 g/L.

x mL 0.2 M-NaOAc and y mL 0.2 M-HOAc mixed

Na2HPO4 – NaH2PO4 Buffer PREPARATION, pH 5.8-8.0 at 25 °C1

Na2HPO4 • 2H2O, MW 178.05; 0.2 M contains 35.61 g/L. Na2HPO4 • 12H2O, MW 358.22; 0.2 M contains 71.64 g/L. NaH2PO4 • H2O, MW 138.01; 0.2 M contains 27.6 g/L. NaH2PO4 • 2H2O, MW 156.03; 0.2 M contains 31.21 g/L.

x mL 0.2 M-Na2HPO4, y mL 0.2 M-NaH2PO4; diluted to 100 mL with H2O

Imidazole (glyoxaline) – HCl Buffer PREPARATION, pH 6.2–7.8 at 25 °C1

Imidazole, C3H4N2, MW 68.08

25 mL 0.2 M-imidazole (13.62 g/L), x mL 0.2 M-HCl, diluted to 100 mL with H2O

Sodium Carbonate – Sodium Bicarbonate Buffer PREPARATION, pH 9.2-10.81

Na2CO3 • 10H2O, MW 286.2; 0.1 M contains 28.62 g/L. NaHCO3, MW 84.0; 0.1 M contains 8.40 g/L.

x mL 0.1 M-Na2CO3 and y mL 0.1 M-Na2HCO3 mixed

Buffer Preparation Formulas and Equations

Percentage by weight (w/v)

(% buffer desired / 100) × final buffer volume (mL) = g of starting material needed.

Molar Solutions

desired molarity × formula weight × solution final volume (L) = grams needed

Henderson-Hasselbach Equation

Reference1. Dawson R, Elliot D, Elliot W, Jones KM. 1986. Data for Biochemical Research. 3rd ed.. Oxford Science Publ.. Related ProtocolsA Simple Strategy for Protein Enrichment Using UltrafiltrationAmicon® Stirred CellsConditioning Purified Membrane ProteinsDesalting/Buffer Exchange and Concentration for Affinity Chromatography of Tagged ProteinsDesalting Samples Using Mini Dialysis KitDetergent Removal with Amicon® Pro Centrifugal FiltersExtracellular Vesicle ProtocolLarge volume concentration and diafiltration with Amicon® Stirred CellsRelated Product CategoriesBiological BuffersLaboratory Dialysis & Diafiltration DevicesLaboratory Concentration DevicesBuffers & pH Adjusters TopSign In To ContinueTo continue reading please sign in or create an account.Sign InDon't Have An Account?Regis

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不同pH磷酸缓冲液（PB buffer）的配制方法介绍 - 联硕生物

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不同pH磷酸缓冲液（PB buffer）的配制方法介绍

来源于：上海联硕生物科技有限公司，浙江联硕生物科技有限公司 | 发布时间：2023/4/24 17:03:00

磷酸缓冲液也叫做磷酸盐缓冲液，英文名为Phosphate Buffer，是生物化学研究中使用最为广泛的一种缓冲液，磷酸缓冲液的配制我们一起来了解一下。首先，按照下表所给定的体积，混合1 mol/L的磷酸二氢钠(单碱)和1mol/L磷酸氢二钠(双碱)贮液，获得所需pH的磷酸缓冲液。

配制1 mol/L 的磷酸二氢钠(NaH2PO4?H2O)贮液：溶解138g于足量水中，使终体积为1L; 1mol/L 磷酸氢二钠(Na2HPO4)贮液:溶解142g于足量水中使终体积为1L。

1mol/L 磷酸二氢钠(ml) lmol/L 磷酸氢二钠(ml) 最终pH值

877 133 6.0

850 150 6.1

815 185 6.2

775 225 6.3

735 265 6.4

685 315 6.5

625 375 6.6

565 435 6.7

510 490 6.8

450 550 6.9

390 610 7.0

330 670 7.1

280 720 7.2

0.1mol/L是在1L水中含有的磷酸盐物质的总摩尔。 用磷酸氢二钠和磷酸二氢钠做缓冲液其浓度为： 磷酸氢二钠20.7472g/L; 磷酸二氢钠3.1167g/L。即若配制100mL，则在100ml水中加入2.0747g磷酸氢二钠和0.3117g磷酸二氢钠。

通常使用的磷酸钠缓冲液有磷酸钠缓冲液(NaH2PO4&Na2HPO4)和磷酸钾缓冲液 (K2HPO4&KH2PO4)，由于它们有二级解离，缓冲的pH值范围很广。那么，各种PH值的磷酸盐缓冲液如何配置?

各种PH值的磷酸盐缓冲液的配制

磷酸盐缓冲液

取磷酸二氢钠38.0g，与磷酸氢二钠5.04g,加水使成1000ml,即得。

磷酸盐缓冲液(pH2.0)

甲液:取磷酸16.6ml，加水至1000ml，摇匀。乙液：取磷酸氢二钠71.63g，加水使溶解成1000ml。取上述甲液72.5ml与乙液27.5ml混合，摇匀，即得。

磷酸盐缓冲液(pH2.5)

取磷酸二氢钾100g，加水800ml，用盐酸调节pH至2.5,用水稀释至1000ml。

磷酸盐缓冲液(pH5.0)

取0.2mol/L磷酸二氢钠溶液一定量,用氢氧化钠试液调节pH值至5.0，即得。

磷酸盐缓冲液(pH5.8)

取磷酸二氢钾8.34g与磷酸氢二钾0.87g,加水使溶解成1000ml，即得。

磷酸盐缓冲液(pH6.5)

取磷酸二氢钾0.68g,加0.1mol/L氢氧化钠溶液15.2ml，用水稀释至100ml，即得。

磷酸盐缓冲液(pH6.6)

取磷酸二氢钠1.74g、磷酸氢二钠2.7g与氯化钠1.7g，加水使溶解成400ml，即得。

磷酸盐缓冲液(含胰酶)(pH6.8)

取磷酸二氢钾6.8g,加水500ml使溶解,用0.1mol/L氢氧化钠溶液调节pH值至6.8;另取胰酶10g，加水适量使溶解，将两液混合后,加水稀释至1000ml，即得。

磷酸盐缓冲液(pH6.8)

取0.2mol/L磷酸二氢钾溶液250ml，加0.2mol/L氢氧化钠溶液118ml，用水稀释至1000ml，摇匀，即得。

磷酸盐缓冲液(pH7.0)

取磷酸二氢钾0.68g，加0.1mol/L氢氧化钠溶液29.1ml，用水稀释至100ml，即得。

磷酸盐缓冲液(pH7.2)

取0.2mol/L磷酸二氢钾溶液50ml与0.2mol/L氢氧化钠溶液35ml，加新沸过的冷水稀释至200ml，摇匀，即得。 磷酸盐缓冲液(pH7.3)

取磷酸氢二钠1.9734g与磷酸二氢钾0.2245g,加水使溶解成1000ml，调节pH值至7.3，即得。

磷酸盐缓冲液(pH7.4)

取磷酸二氢钾1.36g， 加0.1mol/L氢氧化钠溶液79ml，用水稀释至200ml，即得。

磷酸盐缓冲液(pH7.6)

取磷酸二氢钾27.22g，加水使溶解成1000ml，取50ml，加0.2mol/L氢氧化钠溶液42.4ml，再加水稀释至200ml，即得。

磷酸盐缓冲液(pH7.8)

甲液：取磷酸氢二钠35.9g，加水溶解，并稀释至500ml。

乙液：取磷酸二氢钠2.76g，加水溶解，并稀释至100ml。取上述甲液91.5ml与乙液8.5ml混合，摇匀，即得。

磷酸盐缓冲液(pH7.8～8.0)

取磷酸氢二钾5.59g与磷酸二氢钾0.41g，加水使溶解成1000ml，即得。

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